Em toxicologia, dose letal mediana (DL₅₀ ou LD₅₀, do inglês Lethal Dose) é a dose necessária de uma dada substância ou tipo de radiação para matar 50% de uma população em teste (normalmente medida em miligramas de substância por quilograma de massa corporal dos indivíduos testados). A sua determinação é feita expondo cobaias a diferentes doses da substância a ser testada por um determinado período de tempo até se determinar aquela que mata apenas metade da população testada. O DL₅₀ é frequentemente usado como um indicador da toxicidade aguda de uma substância; quanto maior a dose que será letal, menos tóxica é considerada. O teste foi criado por J.W. Trevan em 1927, mas está a ser preterido em algumas jurisdições em detrimento de testes como o procedimento de dose fixa; no entanto, o conceito e o cálculo da DL₅₀ para efeitos de comparação ainda são largamente utilizados, apesar de ser considerado fraco como uma medida útil de toxicidade.